近日，國際學術期刊Microbiology Spectrum在線發表了我校動科動醫學院何啟蓋教授團隊題為(wei) “TurboID Screening of the OmpP2 Protein Reveals Host Proteins Involved in Recognition and Phagocytosis of Glaesserella parasuisby iPAM Cells”的研究論文。該研究通過TurboID鄰近標記技術，揭示了豬格拉瑟氏菌OmpP2蛋白與(yu) 宿主細胞的互作蛋白質組，並通過過表達和siRNA幹擾技術證實宿主細胞膜蛋白CAV1、ARF6和PPP2R1A參與(yu) iPAM細胞對豬格拉瑟氏菌的識別與(yu) 吞噬。該研究從(cong) 宿主的角度揭示了豬格拉瑟氏菌入侵宿主細胞的關(guan) 鍵蛋白，進一步闡明了豬格拉瑟病的致病機理，為(wei) 治療和防控提供了新的思路。

豬格拉瑟氏菌是定植於(yu) 豬上呼吸道的一種常在菌，但在特定的條件下，例如豬群應激、免疫力低下或者伴隨其他病原混合感染時，該菌可以侵入機體(ti) 各係統組織，引起以纖維素性多發性漿膜炎、關(guan) 節炎和腦膜炎為(wei) 臨(lin) 床特征的革拉瑟氏病。何啟蓋教授團隊多年來一直專(zhuan) 注於(yu) 豬格拉瑟氏菌的致病機製研究。TurboID為(wei) 生物素連接酶，其在遊離生物素存在的條件下，可將10 nm範圍內(nei) 的蛋白質進行生物素標記，之後通過鏈黴素親(qin) 和磁珠對生物素化的蛋白進行捕獲及進行質譜鑒定，可得到與(yu) 目標蛋白互作的蛋白質組。本研究通過將豬格拉瑟氏菌外膜蛋白OmpP2與(yu) TurboID融合表達，並將重組蛋白與(yu) iPAM細胞互作，共鑒定到240個(ge) 與(yu) OmpP2互作的宿主蛋白，其中包含四個(ge) 膜蛋白（CAV1、ARF6、PPP2R1A和AP2M1）。利用過表達和siRNA幹擾技術證明CAV1、ARF6和PPP2R1A參與(yu) iPAM細胞對豬格拉瑟氏菌的識別和吞噬。本研究表明，TurboID鄰近標記技術是研究病原菌與(yu) 宿主蛋白互作的有力工具。

圖1. TurboID鄰近標記技術示意圖

圖2.質譜鑒定結果

我校動科動醫學院博士生江昌盛為(wei) 論文第一作者，李文濤教授和何啟蓋教授為(wei) 論文通訊作者。該研究得到了財政部和農(nong) 業(ye) 農(nong) 村部：國家現代農(nong) 業(ye) 產(chan) 業(ye) 技術體(ti) 係資助（CARS-35）的資助。

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審核人：李文濤、何啟蓋